Sociedad Argentina de Citología

Ficha – Coloración de ZIEHL -NEELSEN

Significado Clínico:

 

Método tradicional para la detección de Bacilo Tuberculoso. Para empleo sobre esputo concentrado o extendido, líquido Céfalo Raquídeo, orina,  BAL. Las mico-bacterias se diferencian de otros microorganismos por sus peculiares propiedades tintoreales. Su tinción es difícil pero una vez teñidas son resistentes a la decoloración por la acción de ácidos minerales, razón por la cual han recibido la denominación de Bacterias acidorresistentes.  Los preparados a colorear con esta técnica deben estar secos al aire.

 

Materiales:

 

  1. Rejilla para soporte de los vidrios a colorear.
  2. Kit de Ziehl Biopur o Biopack , contiene los siguientes reactivos: -Solución de Fucsina Básica – Decolorante -Solución de Azul de Metileno
  3. Encendedor.
  4. 1Torunda de algodón.
  5. 1 Pinza  para hacer un Hisopo Mecha con la Torunda de Algodón.
  6. Pipetas plásticas de 3 ml.

Procedimiento:

  1. Colocar la Rejilla sobre la pileta, y sobre ésta, el vidrio con el material hacia arriba.
  2. Echar con pipeta agua  a fin de arrastrar los restos de polvo que pueda haber sobre la muestra.
  3. Escurrir el agua del vidrio.
  4. Cubrir la muestra con Fucsina Básica.
  5. Formar un hisopo con la pinza y la torunda de algodón, sumergirlo en alcohol y encender con el encendedor.
  6. Pasar el mismo por debajo del extendido a cierta distancia para evitar que se quiebre por el calor, hasta desprendimiento de vapores.
  7. Dejar enfriar y lavar con agua.
  8. Decolorar con el Decolorante del Kit y lavar con abundante agua hasta eliminar todo rastro de fucsina.
  9. Cubrir con Solución de Azul de Metileno por 2  minutos. Lavar con agua y dejar secar el portaobjetos.
  10. Montar con Bálsamo de Canadá. Los bacilos acidorresistentes aparecerán como bastones rojos sobre fondo azul.

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